Coloration de GRAM

Le monde bactérien

• introduction
• morphologie
• structure
• nutrition

Les applications en T.P.

• le laboratoire de microbiologie
• consignes de sécurité

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    - lavage de la paillasse

    - élimination des déchets

• techniques utilisées

   - isolement

   - coloration de gram (1,2)

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Applications au secteur médical et industriel

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Principe 

Cette coloration différentielle repose sur l'aptitude ou non de la paroi bactérienne à s'opposer à la décoloration par l'éthanol. Un frottis bactérien est préalablement séché puis coloré au violet de gentiane. 

• pour les bactéries dites GRAM+ : leur paroi est épaisse et composée de peptidoglycane qui leur donne leur imperméabilité à l'éthanol. Chez  ces bactéries, la décoloration échouera, on dit que la bactérie conserve sa couleur violette. 

• pour les bactéries dites GRAM- : leur paroi ne contenant qu'une fine couche de peptidoglycane et composée de lipides en quantité importante. la décoloration sera effective, le cytoplasme de la bactérie sous l'action de l'alcool sera décoloré. Une contre coloration à la fuschine (colorant rose) recolorera en rouge rosé les cytoplasmes décolorés.  

Observation aux microscope d'un frottis coloré par la technique de coloration de GRAM 

On observe des bacilles GRAM+ (bactéries en bâtonnets violettes), des coques GRAM+ (bactéries sphériques violettes) et des bacilles GRAM-.